Kit ELISA Antibodi Brucella

Spesifikasi

 

Prosedur & Interpretasi Uji

 

Langkah 1 Prosedur Tes

1.1 Persiapan Larutan Cuci

Wkonsentrasi orking wCairan Ashing:Sebelum digunakan, solusi cuci harus dikembalikan ke suhu kamar (20-25 derajat) dan dikocok secara merata untuk membuatnya seragam. Kemudian encerkan 20 kali larutan pencucian terkonsentrasi dengan air murni (misalnya, larutan pencucian terkonsentrasi 5ml ditambahkan ke air murni 95ml), aduk rata, dan cairan pencuci yang diencerkan dapat disimpan pada derajat 2-8 selama 7 hari.

1.2 Persiapan Sampel

Darah Hewan Whole diambil, disentrifugasi pada 4000rpm selama 10 menit, dan supernatan dikumpulkan. Serum juga dapat dikoagulasi secara alami tanpa hemolisis.

②Ketika ukuran sampel besar, untuk memastikan waktu reaksi eksperimental konsisten. Campur sampel serum dengan solusi kerja antibodi pada 1: 1 dalam pelat pengenceran (sampel serum 70UL + 70 UL Solusi kerja antibodi). Kontrol negatif dan kontrol positif sama dengan sampel serum.

1.3 Prosedur Uji

① Ambil label enzim microplate (sesuai dengan jumlah sampel, dapat dibongkar dan digunakan beberapa kali), menyiapkan dua sumur masing -masing untuk kontrol negatif dan positif, tambahkan 100ul dari campuran yang dicampur ke label mikro label enzim. Kocok dengan lembut sampel di sumur, menggunakan film pelat sealing untuk menutupi pelat, dan diinkubasi pada 37 derajat selama 30 menit.

②open film pelat penyegelan, kocok larutan di dalam piring dengan baik, tambahkan 300μl cairan cairan konsentrasi kerja ke masing -masing sumur, dan kemudian buang cairan di sumur. Ulangi langkah -langkah di atas 5 kali, dan akhirnya keringkan di atas kertas penyerap bersih.

③DKonjugasi enzim iluted:Encerkan enzim konjugat (50 ×) 50 kali (misalnya: 20UL enzim konjugat konsentrat + 980 ul diluen 1, jumlah spesifik yang diperlukan dihitung sesuai dengan jumlah sampel uji), aduk rata dan sisihkan.

④addd 100μl enzim konjugat ke masing -masing sumur, tutupi pelat, dan inkubasi pada 37 derajat selama 30 menit.

⑤ Plat enzim mencuci, operasi spesifiknya sama dengan ② di atas.

⑥addd 100μl Substrat Solusi ke masing -masing sumur, tutup pelat dan inkubasi selama 10 menit pada 37 derajat dari cahaya.

⑦Meng 50μL Solusi berhenti untuk setiap sumur, dan tentukan hasilnya dalam waktu 5 menit.

 

Langkah 2 Interpretasi Hasil

 

Nilai OD450 dari setiap sumur dibaca pada 96- pembaca microplate yang baik.

2.1 Validasi

 

Nilai rata -rata OD45 0 nm dari kontrol positif adalah <0,35 dan nilai rata -rata OD450NM dari kontrol negatif/kontrol positif lebih besar dari atau sama dengan 3,5, hasil eksperimen valid. Kalau tidak, tes harus diulang.

2.2 Metode Perhitungan

Untuk setiap sampel, hitung PI (blockingr AT) sebagai berikut menggunakan sampel yang dikoreksi dan nilai kontrol:

2.3 Interpretasi Hasil

Ketika PI <20%, itu dinilai sebagai negatif.

Ketika PI> 30%, itu dinilai positif.

Ketika 20% kurang dari atau sama dengan PI kurang dari atau sama dengan 30%, dinilai mencurigakan, dan menyarankan untuk mengulangi pengambilan sampel dan menguji satu minggu kemudian.

Tag populer: Brucella Antibody ELISA Kit, China Brucella Antibody ELISA Kit Pemasok, Produsen, Pabrik